產(chǎn)品名稱：MiSeq Reagent Kit v2（500-cycles）基因測(cè)序試劑盒

產(chǎn)品貨號(hào)：MS-102-2003

產(chǎn)品規(guī)格：

大輸出                              8.5 Gb（500個(gè)循環(huán)數(shù)MiSeq Reagent Kit v2）、5.1 Gb（300個(gè)循環(huán)數(shù)MiSeq Reagent Kit v2）、1.2 Gb（300個(gè)循環(huán)數(shù)MiSeq Reagent Micro Kit v2）、0.850 Gb（50個(gè)循環(huán)數(shù)MiSeq Reagent Kit v2）、0.5 Gb（500個(gè)循環(huán)數(shù)MiSeq Reagent Nano Kit v2）、0.3 Gb（300個(gè)循環(huán)數(shù)MiSeq Reagent Nano Kit v2）

每次運(yùn)行獲得的大read數(shù)    多達(dá)1500萬

核酸類型                             DNA, RNA

試劑類型                             簇生成, 雙端測(cè)序, 邊合成邊測(cè)序

技術(shù)                                   測(cè)序

系統(tǒng)兼容性                         研究模式下的MiSeqDx ,研究模式下的MiSeq FGx, MiSeq , MiSeq

產(chǎn)品介紹：

MiSeq試劑盒v2實(shí)現(xiàn)更高通量，減少M(fèi)iSeq運(yùn)行次數(shù)。MiSeq試劑盒v2保留了與v1試劑盒相同的即用型預(yù)裝試劑盒，但改良了化學(xué)過程，提高簇密度，減少循環(huán)時(shí)間，并提高質(zhì)量(Q)分值。目前還提供Micro和Nano規(guī)格的MiSeq試劑盒v2，適合低通量的應(yīng)用。

改良化學(xué)過程后，循環(huán)時(shí)間更快、片段更長(zhǎng)、輸出更多

雙表面成像實(shí)現(xiàn)的片段數(shù)是v1試劑盒單表面成像的兩倍

使用500次循環(huán)的試劑盒可擴(kuò)展片段長(zhǎng)度

選擇適合您應(yīng)用的循環(huán)次數(shù)（50、300或500）

與升級(jí)的MiSeq系統(tǒng)結(jié)合使用，MiSeq試劑盒v2的雙表面成像可使每個(gè)流動(dòng)槽的通量翻倍。MiSeq試劑盒v2提供可生成較長(zhǎng)片段長(zhǎng)度的500次循環(huán)格式，以及廣受歡迎的50次循環(huán)和300次循環(huán)格式。

MiSeq試劑盒v2有標(biāo)準(zhǔn)、Micro和Nano三種配置，能滿足特定項(xiàng)目需求和可擴(kuò)展輸出量。

所有MiSeq試劑組件均采用RFID編碼，并與MiSeq系統(tǒng)智能交互，以驗(yàn)證與用戶定義的應(yīng)用程序的兼容性。

一個(gè)MiSeq試劑盒v3的也可以。它提供600循環(huán)格式，允許任何Illumina測(cè)序系統(tǒng)具有長(zhǎng)的讀取長(zhǎng)度，或150循環(huán)格式，可實(shí)現(xiàn)計(jì)數(shù)應(yīng)用。

該產(chǎn)品也可作為Illumina Advantage（TG）產(chǎn)品提供。Illumina Advantage大規(guī)模測(cè)序產(chǎn)品具有特定批次的出貨和測(cè)試，延長(zhǎng)的保質(zhì)期和良好的變更通知，可提高實(shí)驗(yàn)室效率。

產(chǎn)品名稱：illumina基因測(cè)序v2試劑盒500次 病毒        產(chǎn)品貨號(hào)：MS-102-2003

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熱賣產(chǎn)品：

品牌       產(chǎn)品貨號(hào)     產(chǎn)品名稱

產(chǎn)品名稱：MiSeq Reagent Kit v2（500-cycles）基因測(cè)序試劑盒

產(chǎn)品貨號(hào)：MS-102-2003

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Illumina二代測(cè)序技術(shù)，邊合成邊測(cè)序（SBS），是廣泛采用的新一代測(cè)序（NGS）技術(shù)，負(fù)責(zé)產(chǎn)生世界上90％以上的測(cè)序數(shù)據(jù)。

Illumina的二代測(cè)序技術(shù)稱為邊合成邊測(cè)序(Sequencing-by-Synthesis,簡(jiǎn)稱SBS)。SBS主要包括堿基延伸、熒光激發(fā)及信號(hào)收集、剪切等3個(gè)步驟。這3個(gè)步驟可以重復(fù)，循環(huán)進(jìn)行。每循環(huán)一次測(cè)定一個(gè)堿基。想測(cè)定多少個(gè)堿基（即讀長(zhǎng)），就循環(huán)多少次。測(cè)序循環(huán)次數(shù)可以在軟件里設(shè)定。到底測(cè)序多長(zhǎng)合適，要根據(jù)項(xiàng)目性質(zhì)和需求來決定。大多數(shù)情況下，SR實(shí)驗(yàn)（單端測(cè)序）測(cè)定1x50個(gè)堿基，PE實(shí)驗(yàn)（雙端測(cè)序）測(cè)定2x150個(gè)堿基。

1 堿基延伸

Illumina測(cè)序試劑里所使用的dNTP級(jí)具特色，它們同時(shí)具有兩個(gè)修飾基團(tuán)：一個(gè)熒光基團(tuán)，一個(gè)可逆終止基團(tuán)。A、G、C、T 4種堿基分別標(biāo)記4種不同的熒光基團(tuán)，它們?cè)诓煌ㄩL(zhǎng)的激光激發(fā)下，能夠發(fā)射不同波長(zhǎng)（即顏色）的熒光。熒光顏色與堿基種類一一對(duì)應(yīng)，因此根據(jù)激發(fā)光的波長(zhǎng)可以識(shí)別堿基。4種堿基的終止基團(tuán)是一樣的。由于終止基團(tuán)的存在，所有dNTP每次都只能延伸1個(gè)堿基，無論給予多長(zhǎng)的反應(yīng)時(shí)間。又由于該終止基團(tuán)是可逆的，在熒光信號(hào)收集完畢之后，可以用剪切劑切除該終止基團(tuán)，使堿基恢復(fù)自然的可延伸狀態(tài)，這時(shí)即可繼續(xù)進(jìn)行下一輪循環(huán)，再測(cè)定一個(gè)堿基。

可逆終止基團(tuán)技術(shù)是Illumina二代測(cè)序的一大特色。它與橋式PCR技術(shù)一起，構(gòu)成了Illumina二代測(cè)序的兩大支柱，為穩(wěn)定獲得高質(zhì)量的測(cè)序數(shù)據(jù)打下了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。

2 信號(hào)采集

HiSeq系列測(cè)序儀具有紅綠兩根激光管，兩個(gè)濾色片。它們兩兩組合，可以形成4種不同的激發(fā)波長(zhǎng)，正好分別用于激發(fā)A、G、C、T 4種堿基。

Cluster上所標(biāo)記的熒光基團(tuán)在激光激發(fā)下產(chǎn)生的信號(hào)，可以用相機(jī)拍攝或者掃描的方式收集信號(hào)。掃描技術(shù)速度比較快，被X10系列采用。由于FC面積比較大，而且上表面和下表面要分別拍照，所以拍照過程相當(dāng)耗時(shí)。對(duì)于經(jīng)典的HiSeq 2000來說，一次測(cè)序循環(huán)所產(chǎn)生的熒光信號(hào)，需要大約40分鐘的時(shí)間才能拍照收集完畢，時(shí)間比測(cè)序反應(yīng)本身還要長(zhǎng)。

3 剪切

熒光信號(hào)收集完畢后，關(guān)閉激光，用剪切劑去除測(cè)序引物的延伸產(chǎn)物上的堿基所標(biāo)記的熒光基團(tuán)和終止基團(tuán)。兩個(gè)修飾基團(tuán)均被切除，一方面消去干擾熒光，一方面使鏈末端的堿基回復(fù)到自然的可延伸狀態(tài)，為下一輪測(cè)序做好準(zhǔn)備。

再重復(fù)合成、激發(fā)、收集等步驟，即可進(jìn)行第二個(gè)堿基的測(cè)序。

測(cè)序循環(huán)可以重復(fù)多次。理論上可以一直重復(fù)，直到信噪比降低得無法有效識(shí)別堿基信號(hào)為止。由于熒光基團(tuán)的發(fā)光效率持續(xù)不斷在衰減，Taq酶的活性也在持續(xù)不斷地衰減，所以實(shí)際上測(cè)序循環(huán)次數(shù)是有限的，大重復(fù)次數(shù)與sbs試劑的配方有關(guān)。測(cè)序的循環(huán)次數(shù)可以在軟件設(shè)置過程中人為，這個(gè)重復(fù)次數(shù)就是每個(gè)測(cè)序片段的讀長(zhǎng)。目前，Illumina平臺(tái)的讀長(zhǎng)有2x100 bp，2x125 bp，2x150 bp，2x300 bp等多種，其中2x150 bp用得zui廣泛。

單端測(cè)序：?jiǎn)味藴y(cè)序(Single-read)首先將DNA樣本進(jìn)行片段化處理形成200-500bp的片段，引物序列連接到DNA片段的一端，然后末端加上接頭，將片段固定在flow cell上生成DNA簇，上機(jī)測(cè)序單端讀取序列。

雙端測(cè)序：雙端測(cè)序(Paired-end)方法是指在構(gòu)建待測(cè)DNA文庫(kù)時(shí)在兩端的接頭上都加上測(cè)序引物結(jié)合位點(diǎn)，在di一輪測(cè)序完成后，去除di一輪測(cè)序的模板鏈，用對(duì)讀測(cè)序模塊(Paired-End Module)引導(dǎo)互補(bǔ)鏈在原位置再生和擴(kuò)增，以達(dá)到第二輪測(cè)序所用的模板量，進(jìn)行第二輪互補(bǔ)鏈的合成測(cè)序。

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